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克雷白氏肺炎桿菌CG43S3預測為孤兒反應調控蛋白MrkI和CsgD的功能性探討

為了解決kph km/h的問題，作者林小倩 這樣論述：

細菌的訊息傳遞系統中，孤兒感應調控蛋白是指一群帶有磷酸根接收序列功能區但其激酶未明的感應蛋白，本論文針對克雷白氏肺炎桿菌CG43兩個功能未明的孤兒感應調控蛋白MrkI和CsgD做探討。本論文的第一部份分別以qPCR和啟動子活性測試來研究MrkI是否和與其同一控制組的MrkH一樣參與纖毛基因組表現或二次訊息分子c-di-GMP水平的調控。克雷白氏肺炎桿菌CG43有11套纖毛基因組，分別為第一型(fim)、第三型(mrk)、kpa, kpb, kpd, kpe, kpf, kpg, kph, kpi和ecp 纖毛基因組。以qPCR分析的結果顯示：在CG43S3中，主要偵測到第三型纖毛單位蛋白mr

kA基因的表現，第一型纖毛fimA單位蛋白基因的轉錄水平顯著低於mrkA，而其它九套纖毛的表現幾乎無法被偵測；而在剔除mrkI或mrkH後，mrkA轉錄水平顯著降低而相對提升fimA的轉錄，此與已被報導的結果相吻合；另外，kpaA、kpbA及kpdA的轉錄水平因mrkI或mrkH基因的缺失而顯著下降；啟動子序列分析後發現在mrkH、mrkABCDF、fimE、kpbA、kpeA的啟動子區皆有MrkH辨識序列TATCAA，然而，mrkI或mrkH基因缺失除了明顯抑制mrkA表現外，其他啟動子活性均不受影響。另外，qPCR分析顯示mrkI或mrkH基因缺失對幾個在啟動子區有MrkH辨識序列的c-d

i-GMP磷酸二酯酶或環化酶的表現影響相反，此暗示MrkI與MrkH在c-di-GMP水平調控上扮演不同角色。第二部份以活體外磷酸根傳遞分析以推斷CpxA是否為傳遞磷酸根給CsgD的激酶:以Pro-Q Diamond磷酸化蛋白質螢光染劑檢測結果顯示CsgD可被染上螢光，此支持其為孤兒反應蛋白的可能性；在 CG43S3[pQE81L-CsgD]以IPTG誘導CsgD表現後，其FimA量及酵母菌凝集力增加，而此影響會因cpxA基因缺失而消失，相對的，剔除rcsC或rcsD基因不影響CsgD表現對第一型纖毛表現的影響，此暗示CpxA可影響CsgD對於第一型纖毛的調控；雖然IPTG誘導CsgD表現後無

法增加其胞外多醣的生成，卻發現CG43S3[pQE81L-CsgD-N]在剛果紅培養基上所呈現之紅色沉澱會因cpxA基因缺失而消失，而 CpxA是否為影響CsgD-N磷酸化的激酶還待確認。

ADC14高矽鋁合金鑄件之熱處理與脈衝硬質陽極處理探討

為了解決kph km/h的問題，作者葉啟禎 這樣論述：

本研究係針對鑄件ADC14高含矽量鋁合金之脈衝陽極處理，探討其在硫酸、草酸、硫酸鋁三種混合酸於0℃溶液中的硬質陽極處理，利用脈衝式定電壓35 V/50 ms-2 V/5 ms，進行陽極處理電解時間30 min、60 min、120 min，以尋求此種車用高含矽鋁合金之最佳的硬質陽極處理條件，本實驗係利用維克式硬度計、電子顯微鏡(OM)、渦流式膜厚儀、線性磨擦試驗機、場發式電子顯微鏡(SEM+EDS)及X-ray 繞射儀（X-ray Diffractometer, XRD）等分析，比較各種不同硬質陽極處理條件對ADC14鋁合金鑄件形成表面陽極處理之影響。 研究結果熱處理溫度20

0℃、300℃、350℃的ADC14鋁合金鑄件之晶粒細化熱處理溫度350℃，進行(硫酸+草酸+硫酸鋁) 0℃混酸溶液電解時間120min，於脈衝式定電壓35 V/ 50 ms -2 V/ 5 ms條件下，所獲得硬質陽極氧化膜厚度18.3μm，亦得陽極氧化膜硬度值442.1HV，此條件陽極氧化皮膜，使用Taber CS17線性磨擦試驗機(JIS H8682-1)進行5000次往復式磨耗試驗，所得摩耗損失1mg，其相較硫酸、硫酸+草酸，進行5000次往復式摩耗試驗，所得摩耗損失16mg、3.1mg。 從實驗中最佳陽極處理條件，運用於無段自動變數器CVT(Continuous Variable

Transmission)零件上，將CVT表面形成一層硬質陽極氧化膜，主要其增加CVT表面達到耐磨耗性或減摩之功能性，而又不可失去CVT本身引擎耐久特性及引擎馬力特性，並進行硬質陽極氧化膜與氧化膜處理200 hr 8600 rpm引擎耐久特性測試及引擎馬力特性測試，CVT硬質陽極氧化膜於200 hr 8600 rpm引擎耐久特性測試數據0至20公尺、0至50公尺、0至100公尺及0至200公尺，硬質陽極氧化膜所需時間3.05秒、5.25秒、8.14秒及12.96秒優於CVT無氧化膜處理所需時間為3.04秒、5.26秒、8.18秒及13.17秒，硬質陽極皮膜引擎馬力特性測試(馬力V.S KPH

)整體數據明顯提升馬力，於時速80 Km/hr所數據得知馬力可增加0.68 hp提升8.54%，CVT硬質陽極皮膜引擎馬力特性20 Km/hr~90 Km/hr測試數據明顯提升馬力效率，200小時8600 rpm高速運轉引擎耐久測試的硬質陽極氧化膜和無氧化膜處理，利用輪廓儀量測硬質陽極氧化膜摩耗表面於Movable Face Drive硬質陽極氧化膜磨耗量0.9μm和無皮膜處理磨耗量8.9μm，Movable Face Drive兩者相差之下，無氧化膜增加8 μm摩損量，Face Drive硬質陽極氧化膜磨耗量4.4μm和無氧化膜處理磨耗量8.2μm，Face Drive兩者相差之下，無氧化膜

多3.6μm摩損量，故硬質氧化膜運用於無段自動變數器CVT(Continuous Variable Transmission)可降低與皮帶摩擦損耗。