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Mechanisms of Anticancer Activities of Surfactin from Bacillus subtilis in Oral Squamous Cell Carcinoma

為了解決apex m角色的問題，作者VO THI THUY TIEN 這樣論述：

背景：口腔癌是全球各個地區，特別是南亞地區日益嚴重的健康問題。口腔鱗狀細胞癌（OSCC）是一種侵襲性惡性腫瘤，具有較高的局部轉移現象和不良癒後特性，佔所有口腔癌病例的90%。先前研究發現，來自枯草芽孢桿菌的表面活性素是一種有效的生物表面活性劑，能夠對多種癌症產生細胞毒性作用。雖然一些研究數據顯示，在一些頭頸部癌細胞模型中，枯草芽孢桿菌的代謝物具有抗癌活性，但沒有一個研究數據是有關於枯草芽孢桿菌的表面活性素。此外，其抗癌作用背後的潛在機制仍須進一步釐清和探討。目的：本論文研究目的是探討有關枯草芽孢桿菌表面活性素在OSCC治療中的抗癌潛力。此外，我們也探討了表面活性素的抗癌作用之訊息傳遞路徑，以

促使未來能應用於臨床上。方法：使用兩種人類OSCC細胞株（SCC4和SCC25）進行研究。首先，透過使用PrestoBlueTM細胞活性試劑來評估細胞存活性，偵測枯草芽孢桿菌表面活性素在不同濃度（5，10，15和30 uM）下對OSCC細胞的細胞毒性作用，同時也與人類牙齦纖維母細胞和人類口腔角質細胞相比較。根據細胞活性測定的數據，我們證明30 uM的表面活性素對OSCC細胞具有抗癌作用。為了探討其潛在機制，在表面活性素處理細胞前，先使用特定的藥理性抑製劑或小分子干擾核糖核酸來處理OSCC細胞，然後進行多項實驗以評估各個訊息傳遞分子的表現量，並釐清各分子間的上下游關係。另外，我們也透過DAPI染

色來檢測細胞凋亡現象、使用吖啶橙染色觀察自噬作用、透過西方墨點法、酵素結合免疫吸附分析法和即時聚合酶連鎖反應等方法來分析表面活性素的抗癌機制、使用JC-1染劑來測定粒線體膜電位的變化，及用Fluo-3 / AM探針鑒定鈣離子濃度。最後，我們透過測量細胞內及粒線體ROS的生成和NADPH氧化酶的活性來評估ROS的整體概況。結果：枯草芽孢桿菌的表面活性素可以有效地殺死OSCC細胞，呈劑量和時間依賴性趨勢。表面活性素對OSCC細胞存活的抑制是由細胞凋亡，自噬和細胞週期停滯之間的相互作用引起的，其中ROS和NADPH氧化酶扮演非常重要的角色，因為我們的研究結果證明表面活性素是透過誘發大量的ROS來造成

細胞凋亡的。此外，我們也進一步發現另一條抗癌途徑，即NADPH氧化酶/ROS/內質網壓力/鈣離子，透過該訊息傳遞路徑，表面活性素也能有效地殺死OSCC細胞。有趣的是，表面活性素還可能導致OSCC細胞的自噬作用，最後，我們證明表面活性素可以藉由影響細胞週期相關蛋白來造成OSCC的細胞凋亡現象。結論和相關性：來自枯草芽孢桿菌中的表現活性素是一種非常有前途的抗癌藥物，具有多方面的抗癌機制。儘管如此，我們未來還需要更多詳細的細胞及動物實驗來釐清更多的機轉，以確保表面活性素應用於臨床上的可能性，但是現階段，我們至少已經為許多口腔癌患者提供了一個新的治療策略。