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微小核醣核酸在缺血缺氧皮瓣之角色探討與機轉研究

為了解決kickstand中文的問題，作者張智豪 這樣論述：

中文摘要 I英文摘要 II目錄 VIndex of figures VIII附圖 X縮寫表 XI第一章緒論 11.1文獻回顧 11.2.皮瓣血循不足及缺氧時間 21.3缺血再灌注損傷(Ischemia Reperfusion Injury) 31.4缺血再灌流損傷分子機轉 41.5血管新生作用 51.6 HIF-1α與 TGF-β調控基因 51.7 TGF-β路徑 61.8微小核醣核酸microRNA 71.9研究假設 81.10研究策略 91.10.1 大鼠腹部缺血再灌注部分壞死皮瓣microRNAs表現量分析與細胞凋亡表現分析 91.10.2 人類臍靜

脈內皮細胞缺氧再灌流後microRNAs表現量分析 91.10.3 皮膚纖維母細胞缺氧再灌流後microRNAs表現量分析 91.10.4 探討microRNAs在人類臍靜脈內皮細胞(HUVEC)增生功能中所扮演的角色 101.10.5 探討microRNAs在人類皮膚纖維母細胞(NDHF)增生功能中所扮演的角色 10第二章 研究材料與方法 112.1.大鼠腹部缺氧缺血部分壞死皮瓣建立 112.1.1 建立大鼠腹部皮瓣模型 112.1.2 利用ICG評估大鼠腹部血流 122.2 大鼠腹部皮瓣檢體採集及分析microRNAs表現量及細胞凋亡分析 122.2.1 TUNEL法測定

大鼠腹部皮瓣皮膚細胞凋亡 122.2.2 LC3BI/II免疫熒光染色法測定大鼠腹部皮瓣組織細胞自噬作用 132.2.3 microRNA於大鼠腹部缺血再灌流部分壞死皮瓣表現量分析 142.3 HUVEC缺氧再灌流後分析microRNAs表現量 162.3.1細胞培養 162.3.2 HUVEC 細胞缺氧再灌流實驗 162.3.3 RNA 萃取 162.3.4 MicroRNA轉cDNA 172.3.5定量HUVEC細胞內生性miR-21-5p 172.3.6細胞轉染microRNA抑制劑 192.4 NDHF缺氧再灌流後分析microRNAs表現量 202.4.1細胞培

養 202.5 PART I miR-21-5p與血管新生關係 212.5.1 Tube formation 212.5.2報導基因冷光活性試驗(Luciferase Reporter assay) 212.5.3 miR-21-5p mimic/inhibitor 注射至腹部缺血皮瓣B zone 222.5.4 Laser Doppler and SPY偵測皮瓣血流及血管新生情形 232.5.5 Specimens collect for western blot with Smad7 and CD31 232.6 PART II miR-210-3p 與纖維母細胞增殖關係

252.6.1 WST-1 assay 252.6.2 BrdU assay 252.6.3 Luciferase reporter assay 26第三章 結果 273.1大鼠腹部缺血再灌流部分壞死皮瓣microRNAs表現量分析與細胞凋亡表現分析 273.2人類臍靜脈內皮細胞缺氧再灌流後microRNAs表現量分析 283.3皮膚纖維母細胞缺氧再灌流後microRNAs表現量分析 283.4 Part I: Dual Role of MiR-21-Mediated Signaling in HUVECs and Rat Surgical Flap under Normoxia

and Hypoxia Condition 283.4.1血管攝影系統 (ICG)與雷射多普勒 (Laser Doppler)量化血循不足之缺血皮瓣 293.4.2探討miR-21-5p於人類臍靜脈血管內皮細胞血管成形的角色 293.4.3探討miR-21-5p於人類臍靜脈血管內皮細胞於缺氧環境中的調控機轉 303.4.4 miR-21-5p mimic/inhibitor可影響大鼠缺氧缺血皮瓣的血流 303.5 Part II: 人類皮膚纖維母細胞在缺氧環境誘發miR-210-3p負調節FBXO31基因影響細胞增生機制 323.5.1 miR-210-3p 促進人類皮膚纖維母細

胞 (NDHF)之細胞增生作用 323.5.2 miR-210-3p調節NDHF的FBXO31與SOCS1蛋白表現量 323.5.3 SOCS1非miR-210-3p調控之目標基因 333.5.4 miR-210-3p透過影響FBXO31進而影響纖維母細胞增生 33第四章 討論 344.1 Part I 34Dual Role of MiR-21-Mediated Signaling in HUVECs and Rat Surgical Flap under Normoxia and Hypoxia Condition 344.2 Part II 36人類皮膚纖維母細胞在缺氧環

境誘發miR-210-3p負調節FBXO31基因影響細胞增生機制 364.3 總結 40References 41Figures 51附圖 85