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小兒心室中膈缺損與第二型和第九型基質金屬蛋白酶基因多型性及酵素活性的相關性

為了解決Mio 856 PTT的問題，作者陳睦元 這樣論述：

心室中膈缺損(ventricular septal defect ,VSD)為常見的先天性心臟病之一。其VSDs佔所有先天性心臟病的20%，多數病童的中膈缺損會隨著年紀增長而逐漸變小或完全閉合。目前有許多因素被認為與VSD形成有關，其中特定基因的單核苷酸基因多型性(single nucleotide polymorphism, SNP)被指出是造成VSD疾病主要原因之一。基質金屬蛋白酶 (matrix metalloproteinases, MMPs)是一類活性依賴於Zn2+等金屬離子且參與降解細胞外基質(extracellular matrix, ECM)的蛋白酶家族，其精密調控著組織中E

CM的代謝平衡。MMPs已被報導在胚胎發育、心肌分化，以及心臟組織的重塑扮演著重要的角色，且許多心臟疾病也與MMPs的基因多型性有關。據此，我們檢測VSDs的病患的MMPs基因SNPs與其血漿中MMPs活性，來探討MMPs基因SNP和血液中MMPs活性與VSDs之嚴重程度。自2010年9月起，我們收集了101位7.4 ?b 3.8歲VSDs病童的血液樣品，自白血球萃取其基因組DNA，利用聚合酶連鎖反應-限制酶片段長度多型性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP)來檢測這些病童的M

MP-9 SNPs，包括 -1562C>T、R279Q及R574P，也檢測MMP-2 -735C>T SNP。我們亦分離病童的血漿，以明膠酶電泳(gelatin zymography)測定其MMP-2和MMP-9活性。實驗結果顯示，在所檢測的四個SNPs中，僅有MMP-9 R279Q基因型的分布與VSD的發生有統計上的顯著意義(p < 0.05)，其VSD組中GA基因型的發生頻率明顯高於控制組(分別為52.2%及37.2%)。另一方面，我們依病患超音波檢查之VSD/aortic root (Ao)比值判定病童VSD嚴重程度，我們將之分成輕微缺損(VS；VSD/Ao ?T 0.2)、中度缺損(V

M；0.2 < VSD/Ao ?T 0.3)及嚴重缺損(VL；VSD/Ao > 0.3) 三組。Gelatin zymography分析結果顯示，在VSD病童血漿中皆可測得較高活性之MMP-2與MMP-9，特別在VSD嚴重缺損病童中，與控制組相較，其MMP-2與MMP-9活性表現分別顯著提升60% (p < 0.001) 與50% (p < 0.01)。本研究結果指出MMP-9 SNP R279Q可能與VSD的發生有關，而隨著VSD趨於嚴重時，其血液中MMP-2與MMP-9的活性有增加的趨勢。我們推測MMPs的活性可能影響VSD的嚴重程度或其癒合率，此提供未來繼續探討MMPs影響VSD病理機制

十分有價值的線索。

金針菇萃取物FIP-fve之生物活性及在降低OVA誘發小鼠呼吸道過敏之效益評估

為了解決Mio 856 PTT的問題，作者張程智 這樣論述：

呼吸道過敏性疾病之發生，在過去數十年來不斷攀升，為現今人類普遍關注之疾病。本研究目的主要在探討金針菇 (Flammulina velutipes)其免疫調節蛋白質FIP-fve的生物活性與在降低Ovabumin (OVA)誘發BALB/c小鼠呼吸道過敏的效益。實驗分為兩階段進行，試驗一首先利用新鮮金針菇，經萃取及純化等步驟分離目標蛋白質，經SDS-PAGE與Western blot確認及蛋白質定量後，以流式細胞儀進行FIP-fve免疫生物活性分析，包括自然殺手細胞之毒殺功能、淋巴球次族群分布、淋巴球增殖反應、吞噬細胞之吞噬及自由基活化作用。結果顯示，自然殺手細胞之毒殺功能，在FIP-fve

200 μg口服7天與400 μg口服5及7天和對照組相比具有顯著性提升 (p < 0.05)。周邊血液單核細胞中白血球表現型分析方面，NK1.1及CD25之表現細胞在不同口服天數及劑量上皆有顯著性提升現象 (p < 0.05)。在ConA刺激下，投與100 μg FIP-fve 5天後淋巴球增殖反應明顯高於對照組 (p < 0.05)。此外，在投與200 μg FIP-fve 10天後之吞噬細胞對Salmonella Typhimurium刺激，產生自由基活化作用明顯高於對照組 (p < 0.05)，但在吞噬作用方面，FIP-fve處理組與對照組間並無統計學上差異。試

驗二以口服200 μg FIP-fve 7天的方式，配合OVA溶液鼻腔內 (100 μg/50 μL)及氣管內接種 (1 mg/50 μL)的兩種致敏模式進行FIP-fve之減敏效益評估。結果顯示，無論是何種致敏模式，口服FIP-fve的組別其肺臟相對重量、支氣管肺泡灌洗液 (bronchoalveolar lavage, BAL)中炎症細胞浸潤程度以及肺臟組織對第一類型過敏反應之病變都較對照組輕，且對脾臟細胞有較高量IFN-γ的分泌 (p < 0.05)。在鼻腔內致敏模式中，口服FIP-fve組別之脾臟細胞經致裂原刺激後與對照組相比有較低量IL-4及IL-5的分泌 (p < 0.

05)。而在氣管內致敏模式中，口服FIP-fve的組別與對照組相比有較輕微的過敏臨床症狀 (p < 0.05)。以上研究結果顯示，FIP-fve可提升先天性免疫反應，調控Th1/Th2之分化，進而有降低致敏化個體對過敏原之過敏反應，經常食用金針菇對過敏病患應有所助益。