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應用回應曲面法於蓮花菌多醣體生產最適化及其菌絲球型態與 N-乙醯葡萄醣胺酶特性探討

為了解決麥胞on-line的問題，作者王懿丞 這樣論述：

中文摘要 本研究以動力參數為判斷標準，針對胞外多醣體找出最適化條件。先以一次一因子方式進行搖瓶培養，探討培養基組成，包括碳源、氮源及轉速對蓮花菌菌絲體生長與胞外多醣體生合成的影響，並利用動力參數找出最具影響力之因子，再進行中心混成設計(central composite design, CCD)。一次一因子方式實驗結果顯示，以2%乳糖、0.2%草酸銨及100 rev/min為培養基條件，可得較佳的單位菌體之胞外多醣體比產率(YEp/x)。再以三因子(乳糖、草酸銨及轉速)之中心混成設計，共20個處理組合(8個因子試驗、6個星點及6個中心點)，以隨機編排順序進行實驗，結果以統計軟體STAT

ISTICA進行分析，顯示蓮花菌生合成胞外多醣體的最適條件為3.105%乳糖、0.202%草酸銨及107.74 rev/min，預測YEp/x為1.115 g/g。經實際進行搖瓶發酵產程後，最適培養基之胞外多醣體產量為1.32 g/L，約為原點培養基(2%乳糖、0.2%草酸銨及100 rev/min)胞外多醣體之兩倍。利用影像分析找出不同菌絲球型態與代謝產物的相關性。以有機與無機氮源及雙氮源培養蓮花菌，可獲得最高產量之菌絲體生物質量、胞外多醣體及胞內多醣體之氮源分別是酵母萃取物、麥芽萃取物及蛋白腖，產量分別是2.32 g/L、1.58 g/L及29.08 mg/L。可知代謝產物產生所需要之氮源

種類是不同的。在有利於菌絲體生長的酵母萃取物與硫酸銨，其對於NH4+利用率是高達97%以上。且在酵母萃取物(最佳菌絲體生物質量之氮源)培養下，總菌絲體生物質量之分佈百分率(DPB)之大菌絲球占47%，總菌絲體生物質量之分佈百分率(IDP)之大菌絲球占76.35%，經影像分析後，菌絲球呈現高圓形度與低粗糙度，再經掃瞄式電子顯微鏡觀察菌絲球上菌絲，發現菌絲容易斷裂，並不易再形成菌絲球，只會在菌絲本身有堆疊現象。以及在利用API-ZYM酵素檢驗試劑套組特徵化蓮花菌菌絲體胞內酵素以區分菌株之差異，與醣類利用率有關之高活性酵素為16號(α-葡萄糖苷酶，α-glucosidase)、17號(β-葡萄糖苷酶

，β-glucosidase)及18號(N-乙醯葡萄醣胺，N-aetyl-β-glucosaminidase) 酵素，其中的N-乙醯葡萄醣胺酶具有轉化成N-乙醯葡萄醣胺的能力，其粗酵素液經硫酸銨沉澱、透析、DEAE-Sepharose CL-6B 及Sephacryl S-100HR純化該酵素，收集具活性波峰探討其特性。所得之純化酵素之比活性為0.67 U/mg-protein，回收率為24.46%，純化倍率為3.72倍，最適反應溫度為50℃，最適反應pH為7.0，在Hg2+、Ag+、Mg2+、Zn2+、Ca2+及Mn2+等離子對酵素具抑制作用。關鍵字：蓮花菌、菌絲體生物質量、胞外多醣體、回應

曲面法、N-乙醯葡萄醣胺酶、菌球形態、API-ZYM酵素檢驗試劑套組

以全球血液濃度數據研析全氟烷基物質之人類混合性健康風險

為了解決麥胞on-line的問題，作者郭冠妤 這樣論述：

全氟烷基物質(perfluoroalkyl substances, PFASs)為全球汙染物並廣泛存在環境與人類中，瞭解不同族群共暴露PFASs造成之混合性風險日漸重要。本研究目的為蒐集 2010至 2020 年發表之血清濃度文獻，以評估不同國家青少年、成人及孕婦共暴露全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate, PFOS)、全氟辛酸(perfluorooctanoic acid, PFOA)、全氟己烷磺酸(perfluorohexane sulfonic acid, PFHxS)和全氟壬酸(perfluorononanoic acid, PFNA)引起之混合性風險。暴露

評估為依據文獻提供之統計值以蒙地卡羅(Monte Carlo)模擬法重建血清濃度數據，並彙整人類流行病學、動物試驗及ToxCast高通量體外細胞試驗進行危害特徵描述。本研究使用危害商數(hazard index)將血清濃度與人類及動物試驗資料進行比較，以及運用聯合暴露限值(combined margin of exposure)將血清濃度與體外細胞生物活性數據進行比較，以評估 PFASs 混合性風險。本研究結果顯示青少年、成人及孕婦之PFOS世界血清中位數濃度高於PFOA、PFHxS及PFNA，且成人四種PFASs血清濃度皆高於青少年及孕婦。於成人方面，格陵蘭、丹麥、挪威、波蘭、美國、比利時及

韓國PFOS血清濃度皆顯著高於世界中位數(P < 0.05)。整體而言，基於人類及動物試驗資料之評估結果顯示：(1)不會造成青少年、成人及孕婦肝毒性風險，但可能引起免疫毒性風險；(2)除了中國高暴露孕婦族群外，不會造成發育毒性風險，但對於部分國家孕婦可能引起生殖毒性風險；另一方面，基於ToxCast體外細胞試驗，青少年、成人及孕婦之誘導PPAR及內分泌為低至中關注程度，然而誘導肝及免疫毒性途徑為中至高度關注程度。本研究成果可以提供全球青少年、成人及孕婦PFASs暴露及混合性風險之全面性概述，其有助於政策制定者訂定法規以減少PFASs暴露，從而降低PFASs潛在健康風險。