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當歸萃取液保護神經細胞抗類澱粉蛋白毒性之研究

為了解決xg750規格的問題，作者黃世浩 這樣論述：

本研究由不同萃取條件得到的當歸萃取液，分析其機能性及風味性成分含量的變化，並探討抗氧化及保護神經細胞抗類澱粉蛋白毒性之研究，整個論文由兩部分的實驗所組成。實驗一主要建立最佳抗氧化功能之萃取條件，將當歸以水及20%酒精加熱不同時間所得到的萃取液進行機能性成分分析，同時探討各萃取液之抗氧化及抑制由脂多醣(LPS)誘導小鼠RAW 264.7巨噬細胞產生NO的活性。結果指出，不論是水萃或酒萃，總酚(Total polyphenol)於15分鐘的萃取可以得到最高的萃取量。當歸酒萃液中的揮發性成分含量明顯高於水萃液，篙本內酯(ligustilide)、正丁烯基夫內酯(butylidene phthali

de) 及正丁基夫內酯(butyl phthalide)皆於酒萃30分鐘達到最高量，隨著萃取時間的延長，揮發性成分含量明顯下降。萃取液之總多醣含量顯示水萃組於各時間點皆高於酒萃組。抗氧化的結果顯示各萃取液於清除DPPH自由基、抑制脂質過氧化及抑制DNA relaxation的活性，於短時間的萃取(15 min)，就已表現出最好的效果。在抑制小鼠巨噬細胞生成NO的試驗中，各萃取條件所得到的成分，以20~200 μg/mL的作用劑量，顯示抑制NO生成具劑量關係(dose-dependent)，該結果亦顯示15分鐘的酒萃條件即具最好的活性。最後將抗氧化活性與機能性成分的含量進行相關性分析，結果顯示阿

魏酸及TPA (The total peaks area of phenolic acids)含量與抗氧化活性具正相關。實驗二評估當歸萃取液對於β類澱粉蛋白(β-Amyloid peptide; Aβ)所引起之神經細胞毒性的保護作用，並探討保護由Aβ所造成之神經細胞毒性的可能機制。結果指出，Aβ25-35會造成神經母細胞瘤(mouse neuroblastoma; Neuro 2A)的細胞毒性，Aβ25-35降低Neuro 2A細胞存活率具劑量關係，其LC50為14.9μM。當歸萃取液的處理可以降低由Aβ25-35作用而上升之活性氧分子(ROS)因而提高細胞的存活率。以Aβ25-35作用的神經

細胞有脂質過氧化現象(lipid peroxidation)且降低細胞中麩胱甘肽(glutathione)的含量，經加入當歸萃取液後可改善並恢復之。Aβ25-35作用的細胞明顯降低粒線體膜電位(Δψm)且經由電顯結果觀察到細胞形成自噬空泡(membrane-bound degradative vacuole)且增大細胞質量。這些現象顯示，以Aβ25-35處理細胞所引起的死亡方式是經由細胞自噬(autophage)的途徑。本實驗利用細胞自噬的特異性抑制劑bafilomycin A1及3-methyladenine作用細胞亦得到此結論的支持。當歸萃取液持有與bafilomycin A1及3-met

hyladenine相同的活性，這些結果指出，當歸可以有效的保護神經細胞免於由Aβ25-35造成之細胞自噬形式的毒性損傷。綜合以上結果，開發具抗氧化功能的當歸保健食品，最佳萃取條件是以20%的酒精(傳統米酒濃度)在低於30分鐘的加熱萃取為佳，同時亦顯示當歸可以有效的保護神經細胞免於由Aβ25-35造成之細胞自噬形式的毒性損傷。