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豬苓多糖及併用WR-2721對輻射與化學性遺傳損傷的防護作用研究

為了解決rays價錢的問題，作者吳琇卿 這樣論述：

豬苓多糖及併用WR-2721對輻射與化學性遺傳損傷的 防護作用研究 吳琇卿 指導教授 ： 江素瑛 博士 中國醫藥學院 中國醫學研究所 目的： 本品為多孔菌科Polyporaceae的豬苓菌 Polyporus unbellatus Fries 寄生於椴樹、楓樹等植物根部的菌核，是一種常用於治療水腫泄瀉及泌尿系統感染的常用中藥；豬苓多糖(polysaccharides of Polyporus umbellatus PUPs)則是豬苓的主要有效成分之一； WR-2721(

amifostine)是目前已知的具有輻射防護作用的藥物，但有藥效短暫、價錢昂貴、無法普及應用於臨床的缺點。本實驗的目的是探討豬苓多糖單獨及併用WR-2721對游離輻射與化療藥物cyclophosphamide（CP）所導致遺傳損傷的防護作用如何，以期PUPs可輔助或替代WR-2721在臨床的應用。 方法： 分為3部分：（1）豬苓多糖單獨使用對輻射遺傳損傷之防護試驗： ○1 體外實驗使用人類淋巴胚母細胞株 (TK6)，取新鮮泡製PUPs 30 g/ml、100 g/ml及300 g/ml，輻射前30分鐘給藥，以1.5 Gy的游離輻射照射後48小時，

於螢光顯微鏡下計數染色體損傷微核的生成率 ○2 體內實驗以6~8週ICR公鼠，腹腔注射50 mg/Kg劑量PUPs，於0分、15分、30分、45分鐘後給予6 Gy的游離輻射照射，並於輻射後48小時採鼠尾血計數周邊網狀紅血球的微核生成率。 （2）豬苓多糖單獨及併用WR-2721對輻射遺傳損傷之防護試驗：由微核試驗測量對輻射遺傳毒性之防護效果。 ○1-○1 體外實驗使用 TK6 細胞，取300 g/ml之PUPs單獨或併用300 g/ml之 WR-2721，輻射前30分鐘給藥，於1.5 Gy的游離輻射照射後48小時，計數微核的生成率。 ○1-○2測量細胞群落生成率（pla

ting efficiency PE），且看其相對存活率。 ○1-○3 看其tk 基因之突變率如何。 ○2體內實驗以6~8週ICR公鼠，腹腔注射PUPs 50 mg/Kg劑量單獨或併用200 mg/Kg劑量的WR-2721，給予6 Gy的游離輻射照射，並於輻射後48小時計數微核生成率。 ○3 以○2項游離輻射照射後的老鼠肝臟，分別測量DNA鍵結物8-OHdG與脂質過氧化Lipid Peroxidation（LPO）。 （3）豬苓多糖單獨使用對化療藥物遺傳損傷之防護試驗： ○1 在體外實驗使用TK6細胞，投予300 g/ml PUPs， 30分鐘後再分別暴露於80 g

/ml或120 g/ml劑量的CP，經30分鐘去除PUPs及CP，再培養48小時後，計數微核的生成率。 ○2 體內實驗以6~8週ICR公鼠，腹腔注射PUPs 4.0 mg/kg、 12.5 mg/Kg 和50 mg/Kg的劑量，於30分鐘後給予50mg/Kg劑量的CP，並於CP給藥後48小時採鼠尾血計數微核。 結果： 實驗證明，不管體外、體內試驗，輻射與CP可使染色體損傷而導致微核、DNA鍵結物8-OHdG、LPO、tk 基因突變率的增加，經由豬苓多糖單獨及併用WR-2721事先投予，再暴露於輻射或CP後測定，結果顯示豬苓多糖和WR-2721於體外、

體內試驗統計上均能有意義的降低輻射或CP誘發的實驗值，使我們更確定豬苓多糖和WR-2721對於輻射或CP所誘發的遺傳損傷具有保護能力，況且豬苓多糖抗輻射效果不比WR-2721差。 結論： 體外、體內微核試驗、DNA鍵結物8-OHdG、Lipid Peroxidation（LPO）及tk 基因突變率測試結果顯示，豬苓多糖本身是個不具細胞毒性且有很好輻射與化學防護作用的中藥材成分。 關鍵字：豬苓多糖(polysaccharides of Polyporus umbellatus PUPs)、 WR-27

21、輻射(radiation)、cyclophosphamide (CP)、微核 （Micronuclei）、Lipid Peroxidation（LPO）、DNA鍵結物8- OHdG、tk 基因