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國立清華大學 生物資訊與結構生物研究所 余慈顏、蘇士哲所指導 劉君浩的 膜脂質成分對HIV-1 Vpr蛋白與膜之間交互作用的影響 (2021),提出dpc包膜關鍵因素是什麼,來自於人類免疫缺乏病毒1、後天免疫缺乏症候群、病毒蛋白R、膜、脂質成分、石墨烯場效電晶體、核磁共振、鈣黃綠素釋出、電壓依賴性陰離子選擇性通道、膽固醇、旋轉回聲雙共振、膜蛋白。
而第二篇論文國立勤益科技大學 工業工程與管理系 林文燦、王偉驎所指導 許淇崴的 以毫米波監測控制長照沐浴裝置水溫研究 (2020),提出因為有 長照沐浴、毫米波、樹莓派、田口方法、Omega轉換法、倒傳遞類神經網路的重點而找出了 dpc包膜的解答。
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膜脂質成分對HIV-1 Vpr蛋白與膜之間交互作用的影響
為了解決dpc包膜 的問題,作者劉君浩 這樣論述:
Vpr蛋白在人類免疫缺乏病毒1的生命週期中扮演多重角色,例如,Vpr能夠協助預嵌入複合體(pre-integration complex)穿過核膜進入細胞核、反式激活長末端重複(long-terminal repeat)所調節的基因、誘發細胞凋亡以及引發細胞週期停滯於G2期,而這些角色使病毒對細胞的毒性及影響加劇。另外,研究指出Vpr能夠和膜脂質作用,例如,Vpr能在膜上形成陽離子選擇通道、促使膜的通透性增加,並且能有效的將DNA從膜外送入細胞。然而,我們並不清楚Vpr與膜作用的機制為何,以及此作用會受到哪些因素的影響。在過去,為了大量生產Vpr以研究其結構及特性,藉由大腸桿菌表達重組蛋白的
方式,因受到細菌停滯效應的影響,產量並不理想。因此在之前的蛋白質結構研究中,主要藉由化學合成的方式製造蛋白質,並因受限其溶解度,結構是在極端的有機溶劑中鑑定。在此研究中,我們設計了一個利用大腸桿菌表現His-tagged GB1-fused Vpr蛋白的新穎載體,顯著地提升了蛋白質的產量。藉由細菌在攝氏18度、自訂的培養基(defined growth medium)中所產出高達每升10毫克的蛋白質產量,使後續對Vpr的生物化學及生物物理性質的系統性鑑定更加容易。為了更深入了解Vpr與膜之間的作用,我們分析了Vpr在許多不同類膜構造中的整體二級結構,包括在脂疊(bicelle)、微脂體(lip
osome) 以及利用十二烷基膽鹼(dodecylphosphorylcholine)界面活性劑來形成的微胞(micelle)。另外,在鈣黃綠素釋出實驗與共組裝奈米圓盤實驗中,我們發現Vpr與膜之間的交互作用在含有1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phospho-(1'-rac-glycerol)(DOPG)脂質的情況勝於只含有1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine(DOPC)脂質。為了量化Vpr和膜之間的結合強度,我們更進一步的利用石墨烯場效電晶體(graphene based field effect transistor)生物感
測器,測得Vpr和含有DOPG的膜之間的解離常數為9.6 ± 2.1 μM。而Vpr與只有DOPC的膜之間的作用,無法量測到顯著的變化,證明Vpr與DOPC之間的作用相對微弱。在過去,Vpr促使細胞凋亡的現象被認為是來自於Vpr和電壓依賴性陰離子選擇性通道(voltage-dependent anion channel)之間的交互作用,為了更加了解他們的作用強度,我們利用上述生物感測器來定量。當人類電壓依賴性陰離子選擇性通道1(hVDAC-1)置於只含有DOPC脂質的膜時,我們量測到Vpr和hVDAC-1之間的解離常數為5.1 ± 0.9 μM,為其他鑑定提供了參考依據。在細胞膜中膽固醇是脂筏
的主要成分,在HIV-1的生命週期,特別是病毒組裝及出芽的過程中,扮演重要的角色。因此,我們希望進一步探討膽固醇對Vpr和膜之間的影響。首先,在鈣黃綠素釋放實驗中,發現膜的通透性會隨著膽固醇濃度增加而減少。另外,我們還使用了固態核磁共振來得知Vpr在蛋白微脂體(proteoliposome)中局部區域的化學環境。在交叉極化(cross polarization)魔術角旋轉(magic angle spinning)核磁共振的訊號中,我們發現碳13呈現出較寬的化學位移分布,表示Vpr在蛋白微脂體中感受到多樣的化學環境。在碳{磷}的旋轉回聲雙共振(rotational-echo double-re
sonance)實驗中,我們發現兩種不同退相特徵(dephasing feature)的共振訊號,分別對應於Vpr上的半胱胺酸跟脂質上的磷酸基之間不同的距離。儘管我們並沒有足夠證據顯示膽固醇會直接作用於Vpr,或是改變其結構,但是膽固醇的存在確實改變了Vpr在不同化學環境的分布,這顯示出Vpr跟膜之間的作用確實會受到膽固醇的調控。此篇研究顯示,對於Vpr和膜之間的作用,膜脂質的成分是一個重要的影響因素。我們相信,藉由更深入的了解Vpr的功能以及所扮演的角色,有助於對後天免疫缺乏症候群提供新的治療方法。
以毫米波監測控制長照沐浴裝置水溫研究
為了解決dpc包膜 的問題,作者許淇崴 這樣論述:
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其收斂性,分析結果達到收斂且MSE=0.0016149。藉由此研究結果,能有效在維持及控制沐浴水溫的同時,即時監測被照護者之生命徵象並加以反饋,利用可移動式沐浴裝置使其可更加安全與便利地進行床上沐浴,提高照護品質及降低相關各項成本。
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