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長庚大學 生化與生醫工程研究所 劉裕國所指導 胡柏泰的 開發以改良式VMFB生物反應器進行前處理稻稈生產丁醇之三菌共培養系統 （2015），提出cx 5柴油缺點關鍵因素是什麼，來自於生質丁醇、VMFB 反應器。

而第二篇論文國立中興大學 環境工程學系所 李季眉所指導 高婉婷的 纖維素水解菌Cellulomonas sp.和酵母菌於SSF程序以藻粉產生生質酒精之研究 （2011），提出因為有 微藻、纖維素分解酵素、生質酒精、SSF的重點而找出了 cx 5柴油缺點的解答。

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開發以改良式VMFB生物反應器進行前處理稻稈生產丁醇之三菌共培養系統

為了解決cx 5柴油缺點的問題，作者胡柏泰 這樣論述：

本研究的目的是利用農業廢棄物來生產可作為替代能源之生質丁醇 。由於在農業廢棄物中的農作物含有大量纖維素、半纖維素與木質素等，故本研究係利用共固定化系統將纖維素糖化與發酵於同ㄧ微生物培養系統中進行，實驗中使用 Trichoderma reesei、Aspergillus niger 為糖化水解菌種，以及 Clostridium beijerinckii 為 ABE發酵菌種。本實驗將纖維素水解菌懸浮系統和固定化系統做一比較，發現固定化後之菌體，其活性優於懸浮之菌體。在固定化探討方面，分別針對好氧區及厭氧區進行探討。在好氧區方面，以纖維素水解菌(T. reesei、A. niger)為對象，以穿孔

的方式使培養基能更有效地流經多孔性載體，並藉由提高迴流流速提升溶氧量，比較改良前後菌體的固定化量。並藉由改變固定化的操作方式縮短固定化所需時間。在厭氧區方面，以C. beijerinckii為對象，探討液面高度對液體溶氧度之變化，以及進行包埋法透過不同的海藻酸鈣濃度來探討厭氧菌之最佳固定化條件。本實驗中，水解菌固定化所需天數縮短為 3 天，生長菌量可達 4.8 g，厭氧區以 3% 與 5% 海藻酸鈣濃度比較其丁醇產量，分別為 5.6229 g/L 與 3.6674 g/L，而液面高度以深度 10 cm、20 cm、30 cm比較其溶氧度，分別為 51%、17.4% 、0.1%，最後套用上述最佳

條件，將三菌共培養於本研究室設計VMFB生物反應器，以農業廢棄物稻稈為原料探討丁醇生產的可行性，比較未處理稻稈粉末與前處理的稻稈粉末丁醇發酵之產量，結果得知，未處理稻稈粉末於培養 32 小時，其丁醇產量達 0.144 g/L，前處理稻稈粉末於培養 108 小時，其丁醇產量達 0.381 g/L；為進一步增加丁純之產量，比較在不同溫度下 ABE 發酵的情形，結果顯示，於 30℃、37℃ 及 50℃ 下，分別於 39 小時、33 小時及30 小時丁醇產量達 1.174 g/L、1.21 g/L 及 0.244 g/L，最後套用上述最佳條件進行丁醇生產，結果得知，於 72 小時丁醇產量達 0.470

g/L。

纖維素水解菌Cellulomonas sp.和酵母菌於SSF程序以藻粉產生生質酒精之研究

為了解決cx 5柴油缺點的問題，作者高婉婷 這樣論述：

使用微藻所含纖維素作為生產生質酒精之原料可改善能源與糧食供給之衝突，同時又能解決稻稈等農業作物生長緩慢的缺點。另一方面，由於微藻所含木質素少於農業廢棄物，可減少前處理的困難性。利用藻類生產生質酒精需先將纖維素水解產生醣類後，再進一步使用酵母菌進行醱酵產酒精，而相較於分步水解與醱酵程序（SHF），同步水解與醱酵程序（SSF）具有降低產物抑制纖維素分解酵素活性，以提升酒精產量之優點，因此本實驗目的為利用纖維素水解菌Cellulomonas sp.與酵母菌Saccharomyces cerevisiae以SSF程序對藻株生產生質酒精進行研究。本研究利用Chlorella sp.藻粉分別探討前處理與

水解步驟中HCl 或NaOH 濃度、無機鹽組成、藻粉濃度與水解溫度對於還原醣產量之影響，並探討酵母菌之最適醱酵溫度、pH與初始酵母菌添加量，並於最佳條件下比較不同纖維素分解酵素與不同藻粉種類對於SHF與SSF程序中酒精產量與最大酒精生產速率之影響。另外，由於考慮到纖維素水解菌Cellulomonas sp.會利用纖維素水解所產生的醣類，因此以去除菌體保留胞外酵素之粗酵素液以了解各實驗參數對還原醣產量之影響以及產物累積對於酵素活性之抑制情形。研究發現藻株Graesiella sp.於5 L反應槽培養有最高之纖維素含量（55.18％）與200 mL三角瓶培養方式相比，纖維素含量提升9.6倍。於水解

條件試驗中，以粗酵素液水解Chlorella sp.之最適產醣條件為水解溫度30℃於20 g/L藻粉濃度之Mandels Reese無機鹽液中進行水解，而於前處理條件試驗中發現以2％NaOH前處理藻粉並添加前處理上層液之方式有助於粗酵素液縮短水解產醣時間並提升88%水解產醣。此外，酵母菌之最適產酒精條件為30℃，pH6.5，初始酵母菌添加量為0.07 g/L時，以10 g/L葡萄糖為碳源有最大酒精產量43.0 g/L。結合前處理、水解與醱酵之最佳條件於SHF與SSF程序比較粗酵素液與商業酵素，可發現於SHF程序中對未前處理之藻株Chlorella sp.水解時，使用商業酵素可得到較多還原醣產量

（0.6 g/L）與酒精產量（4.09 g/L），然而其內切型酵素活性受抑制現象也較為明顯（57％），而於SSF中則為使用粗酵素液可得到較好之酒精產量（6.59 g/L）。而改用2％NaOH前處理之藻粉Chlorella sp.為原料且其他條件皆相同下，相較於SHF程序，SSF程序有助於提升3.03倍之乙醇產量。另外，不論以有無前處理之Graesiella sp.藻粉為原料時，其在SHF或SSF程序中皆相較於Chlorella sp.藻粉有較高之酒精產量與產酒精速率。

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