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不同劑量β-胡蘿蔔素對於大白鼠酒精性肝臟疾病之保護效果及作用機轉之探討

為了解決Tracer 900 GT的問題，作者彭湘琦 這樣論述：

本研究利用體內及體外試驗，探討β-胡蘿蔔素是否可利用其抗氧化特性，降低酒精之氧化性傷害，並進一步釐清β-胡蘿蔔素預防大白鼠酒精性肝臟疾病的機制。體外試驗部份，利用大白鼠初代肝細胞，以無添加或有添加酒精 (100 mM) 以及β-胡蘿蔔素 (1 μM與5 μM) 的培養基進行培養24及48小時後，評估肝細胞的抗氧化狀態的改變以及細胞凋亡的現象。結果發現，肝細胞以含酒精之培養基培養，肝細胞存活率顯著降低，GSH/GSSG比值顯著降低及脂質過氧化物 (thiobarbituric acid reactive substance, TBARS) 的堆積，並可觀察到CYP2E1、caspase-3與c

aspase-9的表現量顯著增加，顯示酒精造成肝細胞中氧化壓力增加，進一步使細胞凋亡現象增加。添加1 μ M β-胡蘿蔔素並進行48小時培養，則抑制因酒精所造成的GSH/GSSG比值降低、脂質過氧化物的堆積與CYP2E1的表現，以減少其氧化壓力，而且藉由降低caspase-9的表現量而減少肝細胞進行細胞凋亡，進而降低肝細胞的死亡，顯示β-胡蘿蔔素在此實驗模式中具有抗氧化及抗細胞凋亡之保護作用。體內試驗部分，將Wistar大白鼠依照aspartate aminotransferase (AST) 及alanine aminotransferase (ALT) 分為攝取正常液體飼料組 (C)、補充

低劑量β-胡蘿蔔素組 (CLB)、補充高劑量β-胡蘿蔔素組 (CHB)、佔總熱量36%之酒精液體飼料組 (E)、酒精液體飼料並補充低劑量β-胡蘿蔔素組 (ELB) 及酒精液體飼料並補充高劑量β-胡蘿蔔素組 (EHB) 共6組，每組10隻。低劑量β-胡蘿蔔素之補充為0.52 mg/kg BW/day，高劑量β-胡蘿蔔素之補充為2.6 mg/kg BW/day，飼養期共12週，並分析體內抗氧化狀態及肝臟細胞凋亡現象。由結果可知，大白鼠攝取酒精導致血漿中AST與ALT增加，紅血球GSH/GSSG 比值降低。另外，肝臟中TNF-α濃度顯著增加，CYP2E1蛋白質表現量及脂質過氧化物TBARS濃度顯著增

加，表示大白鼠體內氧化壓力提高。另外，肝臟中Fas ligand、caspase-8、cytochrome c、caspase-9與caspase-3之表現量顯著增加，顯示酒精引起肝臟中細胞凋亡產生。補充低劑量β-胡蘿蔔素後，可降低攝取酒精之大白鼠血漿中AST與ALT，並可降低CYP2E1表現量及TBARS濃度，亦可增加Bcl-xL蛋白質的表現量，降低caspase-9及caspase-3蛋白質表現量。而補充高劑量之β-胡蘿蔔素可降低攝取酒精之大白鼠血漿中AST並降低肝臟中TNF-α及TABRS濃度，可增加Bcl-2蛋白質表現量，降低cytochrome c蛋白質表現量。由此推測，大白鼠長期攝

取酒精會降低其體內抗氧化狀態，而補充低劑量β-胡蘿蔔素可降低酒精造成之氧化傷害，並進一步降低肝臟細胞凋亡發生。綜合以上結果可知，酒精會引起氧化壓力增加，進一步誘發細胞凋亡發生，對肝細胞或肝臟造成傷害。而β-胡蘿蔔素則可能因具有抗氧化特性，藉由降低氧化壓力而減少細胞凋亡產生，進而保護肝細胞或肝臟以預防酒精帶來的傷害，但是β-胡蘿蔔素的投與量與其抗氧化效果並沒有劑量效應。