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海帶岩藻寡醣之生產條件與生理活性及於人類結腸腺癌細胞株 Caco-2 吸收運輸效率之探討
為了解決Nice 100 評價 PTT 的問題,作者陳依婷 這樣論述:
中文摘要 I英文摘要 (Abstract) II目錄 IV圖目錄 XI表目錄 XV附錄目錄 XVII壹、前言 1貳、文獻整理 3一、海藻簡介 31-1. 褐藻植物門 31-1-1. 海帶 41-1-1-1. 海帶型態與分佈 41-1-1-2. 海帶成分與應用 4二、海藻多醣 42-1. 海藻多醣定義 42-2. 海藻多醣之萃取方法 52-3. 海藻多醣之生理活性 52-3-1. 抗氧化活性 52-3-2. 抗病毒活性 62-3-3. 抗凝血活性 62-3-4. 免疫調節活性
6三、海藻寡醣 73-1. 海藻寡醣之萃取方法 73-2. 海藻寡醣之生理活性 73-3-1. 抗氧化活性 73-3-2. 抗病毒活性 83-3-3. 抗凝血活性 83-3-4. 益生性 9四、岩藻聚醣 (Fucoidan) 94-1. 岩藻聚醣之組成與結構特性 94-2. 岩藻聚醣之萃取方法 94-2-1. 熱水萃取法 94-2-2. 稀酸萃取法 104-2-3. CaCl2 溶液萃取法 104-2-4. 超音波萃取法 104-3. 岩藻聚醣水解酵素 (Fucosidase) 1
14-4. 岩藻寡醣及岩藻聚醣之生理活性 114-4-1. 抗氧化活性 114-4-2. 抗凝血活性 114-4-3. 抗血小板凝集活性 124-4-4. 抗發炎活性 124-4-5. 抗病毒活性 13五、人類腸道細胞株 Caco-2 135-1. Caco-2 細胞簡介與特點 135-1-1. Caco-2 細胞之藥物吸收模式 145-1-2. Caco-2 細胞之醣類吸收模式 15参、實驗設計 16肆、材料方法 17一、實驗材料 171-1. 原料 171-2. 實驗菌株 171-3. 實驗細胞株
171-4. 實驗病毒株 171-5. 試驗藥品 181-5-1. 藥品 181-5-2. 菌株培養基組成 191-5-3. 細胞培養液組成 211-5-4. Fucosidase 反應基質 221-6. 濾膜除菌 221-7. 離心式超過濾濾膜 221-8. 薄層層析矽膠片 221-9. 儀器設備 22二、實驗方法 242-1. 海藻之一般成分分析 242-1-1. 水分含量 242-1-2. 灰分含量 242-1-3. 粗蛋白含量 242-1-4. 粗脂肪含量 242-1-5. 碳水
化合物含量 252-2. 菌株保存與活化 252-2-1. 菌株保存 252-2-2. 菌株活化 252-3. 岩藻聚醣之熱水與熱酸萃取 252-4. Fucosidases 粗酵素液製備 262-4-1. 以岩藻聚醣誘導菌株 MA103、MAEF108 生產 Fucosidases 粗酵素液 262-4-2. 以 Nisin 誘導 Lc. lactis rfucI 生產 Fucosidase rfucI 262-5. Fucosidases 酵素活性分析測定 262-6. Fucosidases 水解岩藻寡醣產物之分離 2
72-6-1. 岩藻寡醣水解物製備 272-6-2. 超過濾 (Ultra filtration, UF) 272-7. 岩藻混合寡醣之成分分析 272-7-1. 總糖量測定 272-7-2. 還原糖量測定 272-7-3. 薄層層析 (Thin layer chromatography,TLC) 272-7-4. 高效能液相層析 (High performance liquidchromatography, HPLC) 282-7-5. 傅立葉紅外線光譜分析 (Fourier transform infraredchectroscopy, F
T-IR) 282-7-6. 硫酸酯量測定 282-7-7. 總酚含量測定 292-8. 岩藻混合寡醣之抗氧化活性測定 292-8-1. 清除 DPPH 自由基能力之測定 292-8-2. 亞鐵離子螯合能力之測定 292-8-3. 還原能力之測定 292-9. 岩藻混合寡醣之抗凝血活性測定 302-9-1.活化部份凝血活酶時間 (Activited partial thromboplastin time, APTT) 302-9-2. 抗凝血酶原時間 (Prothrombin time, PT) 302-9-3. 凝血酶時間 (Th
rombin time, TT) 302-10. 岩藻混合寡醣對雙歧桿菌、乳酸桿菌、與產氣莢膜梭菌之生長效果 302-11. 岩藻混合寡醣之抗病毒能力測定 312-11-1. 細胞株培養方法及繼代方法 312-11-2. 細胞株之冷凍保存 312-11-3. 細胞毒性試驗 312-11-4. 抗日本腦炎病毒、腸病毒試驗 322-12. 岩藻混合寡醣之抗發炎活性測定 322-12-1. 細胞株培養方法及繼代方法 322-12-2. 細胞株之冷凍保存 332-12-3. 細胞毒性試驗 332-12-4. Nitric oxid
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swell Insert 培養法 352-13-6. Caco-2 細胞於吸收裝置其單層膜完整性測試 362-13-7. 岩藻寡醣於腸道細胞吸收及運輸測定 362-13-8. 測定運輸液及細胞中總糖量及總蛋白量分析 362-13-9. 測定運輸液之薄層層析 (Thin layer chromatography, TLC 分析 37三、 統計分析 37伍、結果與討論 38一、海帶一般成分組成 38二、探討海帶岩藻聚醣之最適萃取條件 382-1. 最適萃取之溫度 382-2. 最適萃取之時間 382-3.
最適酸萃取之濃度 39三、探討岩藻混合寡醣之生產條件與組成分析 393-1. 岩藻混合寡醣最適酵素水解時間及糖量變化與產率分析 393-2. 薄層色層 (TLC) 分析 403-3. 高效能液相層析 (HPLC) 分析 403-4. 利用化學法提升岩藻寡醣之硫酸基含量 403-5. 傅立葉轉換紅外線光譜 (Fourier transform infrared spectroscopy, FT-IR) 分析 413-6. 可溶性多酚含量分析 42四、岩藻混合寡醣之抗氧化活性分析 424-1.
清除 DPPH 自由基能力 424-2. 還原力測定 434-3. 螯合亞鐵離子能力測定 44五、岩藻混合寡醣之抗凝血活性分析 445-1. 活化部分凝血活酶時間 (Activated partial thromboplastin time, APTT) 445-2. 凝血酶原時間 (Prothrombin time, PT) 455-3. 凝血酶時間 (Thrombin time, TT) 45六、岩藻混合寡醣對雙歧桿菌、乳酸桿菌、與產氣莢膜梭菌之生長 效果 46七、岩藻混合寡醣之抗病毒活性分析 477
-1. 抗日本腦炎病毒北京 1 型試驗 477-2. 抗腸病毒 71 型試驗 48八、岩藻混合寡醣之抗發炎活性分析 498-1. 細胞毒性測試 498-2. 不同濃度 LPS 對 RAW 264.7 細胞存活率之影響 498-3. 一氧化氮 (NO) 生成量試驗 498-4. NBT 還原分析試驗 508-5. 細胞激素 TNF-、和 IL-6 分析 50九、岩藻混合寡醣經 Caco-2 細胞吸收運輸之變化 519-1. 細胞形態之變化 519-2. 細胞毒性測試 519-
3. 運輸液與細胞中總糖及總蛋白量分析 529-4. 運輸液之 TLC 分析 52陸、結論 54柒、參考文獻 56捌、實驗圖表 71玖、附錄 117
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