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環境毒物對C57BL/6J-Tg(mMMP9-EGFP)基因轉殖小鼠精子與著床前胚細胞之影響

為了解決Maybach S500的問題，作者沈胡楷 這樣論述：

中文摘要不當的原物料添加於食品中造成現今食物安全問題，日益嚴重，這些有害物質除造成致癌風險外，也可能影響正常之生殖，如女性不孕、胚受損和流產等，在男性如精子功能受損、精子數目不足等問題。本試驗挑選生活中常見環境毒物：馬兜鈴酸I (aristolochic acid I, AAI )、氯化鎘(cadmium chloride, CdCl2)、雙酚A (bisphenol A, BPA)對MMP9基因轉殖小鼠生殖細胞進行不同試驗。本試驗利用攜帶第九基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase 9, MMP-9)之啟動子接上綠螢光報導基因(EGFP)之基因轉殖小鼠C57BL/6

J-Tg(mMMP9-EGFP)，探討環境毒物對MMP9/EGFP-TG小鼠胚與精子之影響。利用胚體外培養方式進行氯化鎘之試驗，其濃度為10, 20, 30, 40 μM/mL ;及雙酚A試驗，濃度10, 50, 100 μM/mL及1 mM/mL作用於Wt和MMP9/EGFP-TG小鼠胚，比較MMP9/EGFP-TG與Wt小鼠胚之差異。結果顯示，添加20 μM/mL氯化鎘開始影響Wt或MMP9/EGFP-TG小鼠之4細胞期胚之發育。另一試驗，添加50 μM/mL雙酚A開始影響Wt或MMP9/EGFP-TG小鼠8細胞期胚。本試驗試圖利用添加200, 500 μM/mL及1 mM/mL維生素B1

2對經氯化鎘和雙酚A傷害之胚進行修復。20 μM/mL氯化鎘添加維生素B12結果顯示，添加維生素B12，可提升Wt小鼠8細胞期胚發育至桑葚期胚；對MMP9/EGFP-TG小鼠胚，則無助於發育，甚至導致囊胚發育率下降。在50 μM/mL雙酚A添加維生素B12結果顯示，添加維生素B12有助於Wt小鼠4細胞期胚發育至桑葚期胚，但抑制囊胚發育率。在MMP9/EGFP-TG小鼠胚，添加維生素B12，反而抑制4細胞期胚至囊胚之發育率。DCFDA分析結果顯示，添加維生素B12，可抑制經氯化鎘或雙酚A處理Wt或MMP9/EGFP-TG小鼠胚，產生之ROS (P