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國立陽明大學 生化暨分子生物研究所 吳妍華、游麗如所指導 黃莉鈞的 探討Ddx3x在小鼠胃的恆定及胃癌中所扮演的角色 (2012),提出HONDA K18關鍵因素是什麼,來自於Ddx3x。
而第二篇論文國立成功大學 基礎醫學研究所 蕭璦莉所指導 謝政蓉的 E1B缺失性腺病毒對膀胱癌和肝癌的基因治療 (2003),提出因為有 肝癌、腺病毒、基因治療、膀胱癌的重點而找出了 HONDA K18的解答。
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探討Ddx3x在小鼠胃的恆定及胃癌中所扮演的角色
為了解決HONDA K18 的問題,作者黃莉鈞 這樣論述:
DDX3屬於DEAD-box RNA解螺旋酶家族的一員,位於X染色體上p11.3-11.23的位置,在女性中會逃脫X去活化的機制,且參與在RNA代謝、轉錄、轉譯、細胞生長及凋亡等細胞生理調控。在先前研究指出DDX3在肝癌及肺癌中扮演抑癌基因的角色,然而在乳癌中DDX3卻是扮演致癌基因的角色,顯示DDX3在不同的組織中其生理功能有所不同。為了探討DDX3在in vivo中所扮演的角色,實驗室建立Ddx3x條件式基因剔除鼠(conditional knockout mice),實驗結果發現全身性剔除Ddx3x會造成小鼠在胚胎早期死亡,顯示Ddx3x在小鼠胚胎發育過程中扮演很重要的角色。然而,胚胎
死亡使我們無法進行Ddx3x與癌症形成相關的研究,因此,在本論文是利用誘導性單層柱狀上皮細胞表現的轉殖基因小鼠Tg(K18-EGFP, K8-CreERT) 進行Ddx3x基因剔除,探討Ddx3x在單層柱狀上皮中扮演的生理功能,主要專注於小鼠後胃的分析。實驗結果發現,以Tamoxifen (Tam)誘導剔除Ddx3x基因後兩週左右,基因剔除鼠體重下降,胃體中胃腺細胞的結構萎縮短小,並產生不正常排列,以免疫螢光染色確認Ddx3x表現下降,之後體重逐漸回復,並在Tam施打之後18週、36週和38週Ddx3x基因剔除母鼠的後胃做進一步分析。以PAS/Alcian blue染色法進行分析,相較於對照組
小鼠,Ddx3x基因剔除鼠的胃體中有不正常黏液分泌,pit cells、parietal cells和chief cells大量消失;而結合Lectin GS-II的mucous neck cells坐落在對照組小鼠胃單元腺頸部的區域,在Ddx3x基因剔除鼠的胃體中也有擴散開來到腺底部的情形。Ddx3x基因剔除公鼠胃體也出現與母鼠一樣的性狀,但是觀察到性狀出現的時間則較母鼠晚,在Tam施打後第36週,在分析的五隻基因剔除公鼠中,僅觀察到一隻公鼠有胃腺細胞結構異常,一直要到第60週,在分析三隻公鼠中有兩隻公鼠具有此一性狀。由以上結果暗示Ddx3x基因缺失會導致慢性萎縮性胃炎,並進一步導致腸黏膜化
生(metaplasia)的現象。而胃體上皮細胞中Ddx3x缺失如何導致腸黏膜化生的現象,以及最終是否造成胃癌形成,則有待更進一步釐清。
E1B缺失性腺病毒對膀胱癌和肝癌的基因治療
為了解決HONDA K18 的問題,作者謝政蓉 這樣論述:
中文摘要 腫瘤溶解性病毒是一種嶄新的癌症治療法。病毒的治療效果主要是靠病毒本身溶解的特性,和腫瘤細胞與正常細胞間分子的差異性。為了達到選擇性的毒殺腫瘤,其中一種策略是將病毒的基因改造,使其無法在正常的細胞內複製,卻仍能夠溶解腫瘤細胞。在此研究中,我們建構了一E1B缺失性腺病毒,Ad5WS1,並探討它對具有不同p53活性的膀胱癌和肝癌細胞的毒殺性。相對於野生型的p53細胞,Ad5WS1能對突變型的p53癌細胞產生嚴重的細胞溶解。經由感染複製缺陷性腺病毒攜帶報告性基因���{gal的實驗顯示,這種差異性並非是細胞株對腺病毒的感受性不同所致。為了進一步證實Ad5WS1和p53的關聯性,我們送入一
突變性的p53質體於野生型的p53膀胱癌細胞中,此舉能大大的增強Ad5WS1對其毒殺的能力。此外,B型肝炎病毒X蛋白質能夠藉由附著p53而抑制p53的作用。我們將一表現B型肝炎病毒X蛋白質的質體送入野生型的p53 Chang liver細胞中,X蛋白質大量表現於細胞質中,此舉能使大部分的p53滯留於細胞質中妨礙其進入細胞核執行調控的功能。p53轉錄功能的喪失,使得細胞對病毒的感受性大增。此外,在實驗動物中施打Ad5WS1至腫瘤中,能抑制膀胱癌和B型肝炎病毒X蛋白質表現肝癌細胞的生長。如分別將病毒併用阻滞血管新生的抑制劑或化學治療劑,對腫瘤細胞的生長更具有加成性的抑制作用。為了增加病毒對肝癌細胞
的標的毒殺能力,我們將此E1B缺失性腺病毒E1A基因的啟動子改為一特異性在肝細胞表現的啟動子,TTRP,構築出對肝細胞具特異性的腫瘤溶解性病毒,Ad5WS2。 相較於Ad5WS1,Ad5WS2能更有效率地毒殺帶有突變型p53的人類和鼠類的肝癌細胞,然對於同樣帶有突變型p53的非肝癌細胞則否。對於具野生型的p53 Chang liver細胞亦不具有毒殺的能力。此外,在腫瘤內施打Ad5WS2能更有效的降低實驗動物中肝癌細胞的生長能力,但對肺癌細胞則無效。我們更進一步建立小鼠惡性肝癌腹水的模式證明:Ad5WS2能經由腹腔注射的方式較Ad5WS1更專一地複製於腹腔的腫瘤中,以降低腹水的形成和延緩小鼠的
壽命。若合併使用化學治療劑,更能增強此抑制作用。總而言之,本論文發現E1B缺失性腺病毒對膀胱癌和B型肝炎病毒X蛋白質表現的肝癌細胞具有治療的能力,利用具肝細胞特異性的E1B缺失性腺病毒能更有效率和安全地治療肝癌和與惡性肝癌相關的腹水。
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