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國立嘉義大學 微生物免疫與生物藥學系研究所 金立德所指導 黃琳的 抗第一型人類免疫缺陷病毒第三變異區完全人類單株抗體的分析 （2013），提出Escape 2.3 4WD關鍵因素是什麼，來自於HIV-1 V3環、體外定位免疫、單株抗體。

而第二篇論文國立清華大學 工程與系統科學系 曾繁根所指導 張家榮的 多功能性奈米介孔隙材料及其奈米元件之設計與製造 （2010），提出因為有 介孔隙、奈米複合材料、介電泳、虛擬奈米孔道、基因定序的重點而找出了 Escape 2.3 4WD的解答。

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抗第一型人類免疫缺陷病毒第三變異區完全人類單株抗體的分析

為了解決Escape 2.3 4WD的問題，作者黃琳 這樣論述：

Human immunodeficiency viruses (HIV)是以人類為宿主造成後天免疫缺乏症候群acquired immunodeficiency syndrome (AIDS)的病因，針對HIV-1有效廣譜性中和抗體大多是從一些受HIV-1感染的患者中發展。然而在一些研究中已經發現有些患者的血清中具有和不同的HIV-1 subtypes病毒株中和抗體，由於影響中和抗體的決定因素來自於HIV-1病毒外套gp120及gp41。gp120及gp41組成是由前驅蛋白gp160經由修飾後從細胞中釋放，和聚醣屏蔽 (glycan shield)再組裝成病毒粒子包膜後的四級結構—棘突 (sp

ike)，這樣的結構容易促使患者免疫系統中引發無數的結合抗體，卻無法有效地中和病毒。此外HIV-1病毒外套膜上的gp120除負責啟動與CD4分子結合外，尚有其它區域與其協同受體及CD4分子相互作用，結果會引發gp120結構改變、從而將跨膜糖蛋白gp41原本深埋的部份暴露，使gp120的V3環更加接近協同受體，然後gp41導致病毒被膜與靶細胞膜的融合，最後病毒核衣殼 (capsid)進入細胞，尤其是gp120上的V3 loop與宿主細胞的co-receptor在病毒入侵過程中最為關鍵，因此認為在HIV-1 gp120上有特別的保守區域難以被抗體辨認。。針對gp120的V3 loop的抗體常表現中

和作用，故V3環又被稱為為「主要的HIV-1 中和區域 (principal neutralizing domain)」。本實驗主要利用體外定位免疫 (site-directed in vitro immunization)技術：藉由一個含自體T-helper cells、組合式TT胜肽 (由破傷風類毒素組成的15個胺基酸)與刺激B細胞的HIV-1 V3 loop抗原決定位及CD40抗體驅動之培養系統來達成模擬後，將此細胞株LTC5進行限制稀釋試驗和酵素連結免疫吸附分析法克隆以及篩選出純系細胞且具專一性單株抗體，進行定量和親和力分析，然後再分析抗體的基因定序分析。驗證相關之V3廣譜性抗體標的並

完成胜肽合成，以健康捐血者血液為材料，建立體外定位免疫系統的細胞理論及模擬，並且完成體外定位免疫工作，最後三元融合瘤細胞株LTC5生產完全人類IgG單株抗體300毫克，確立完全人類單株抗體之高親合力和完成完全人類單株抗體之基因選殖及部份抗體定序，證實了可由正常且未受感染健康捐血人的淋巴球細胞培育出高親和力的HIV-1之中和抗體。

多功能性奈米介孔隙材料及其奈米元件之設計與製造

為了解決Escape 2.3 4WD的問題，作者張家榮 這樣論述：

開發一個具有奈米孔洞大小可操控性之奈米孔洞通透膜應用於生物檢體過濾技術或是在燃料電池中扮演質子交換膜減少燃料透過質子交換膜以及應用奈米孔洞完成之快速基因定律的操控系統是相當具有挑戰性的工作。此可控制之奈米孔洞大小不只可以藉由製造新的奈米孔隙材料來完成介孔隙物質，尚可以利用在次微米孔洞中加入不均勻電場所產生的介電泳力來控制粒子在其中的傳輸行為而形成一個虛擬奈米孔洞。藉由這些技術皆可以達到開發一個具有奈米孔洞大小可操控性之介孔洞元件或材料。 我們開發了兩種主要的方法來完成這個控制奈米孔隙大小的工作：第一個方法是利用溶劑作為奈米孔洞的鑄造材料，藉由光化學來鍊結環氧樹酯材料以及控制在鍊

結過程中的溶劑含量最後再將此作為鑄造模板的溶劑相移除，就可以製作出具有可控制性奈米孔隙大小的奈米孔隙材料。除此之外此環氧樹酯為了增強其機械強度還加入了具有垂直方向性的多壁奈米碳管來製作出具有高度方向性奈米複合材料，最後測是這個奈米複合材料具有高過於孔隙環氧樹酯113%的機械強度。此外為了增強其應用，在表面處理上也引入了使用254奈米的紫外光結合臭氧環境的表面氧化技術達到表面親水化的處理。此親水化處理不只可以應用於所製作的介孔隙材料應用上，尚且可以用於一般此類環氧樹酯所製作出的封閉式微流道系統的表面親水性改質。此表面改質方式經過驗證是屬於共價鍵的價接方式形成，將可以有效的延長表面處理的時效，使表

面能夠形成一個更加穩定而親水的環境。 除了這種利用環氧樹酯高分子溶劑控制的方式製作出的奈米孔隙材料，尚且開法出一個可以動態控制虛擬奈米孔隙的元件。在一個次微米的孔隙薄膜上，控制在此次微米孔道中的不均勻分布交流電場將會形成一個局部的介電泳效應，利用此介電泳效應將可以有效的控制此次微米孔道的開關大小。其可操控範圍將含跨40奈米到3奈米的尺度，這些控制皆由在奈米侷限空間中的介電泳效應所決定。此外此可控制之虛擬奈米孔道的技術將可以應用於控制去氧核醣核酸分子穿過奈米孔道進行快速基因定序的工作時的速度控制，藉由此虛擬奈米孔道將可以把去氧核醣核酸分子通過奈米孔道的速度減至0.615微米/秒，這個速度將

可以讓基因定序以10千赫茲的頻率完成讀取，較傳統好上五倍的效率。 本研究開發了兩種製作方式的可控制奈米孔隙平台及材料，製作出了一個具有高機械強度以及可控制表面特性以及奈米孔隙大小的高分子材料，以及利用次微米孔道中的介電泳效應來完成控制虛擬奈米通道的大小工作。這將更容易讓可控制的介孔隙整合到微流體系統。實驗結果顯示這兩種方式都可以有效的操控介孔隙的大小尺寸，因應不同的需求應用於生物檢體大小篩檢、燃料電池中使用的防止燃料擴散用的質子傳遞膜材料以及控制基因定序速度的工作。

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