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以雙羥基聚(3-羥基丁酸酯)與聚(癸二酸甘油酯)聚合之多孔性彈性體在血管組織工程上 的研究與應用
為了解決除油膜soft99 的問題,作者陳彥丞 這樣論述:
組織工程,又稱為再生醫學,是現代醫學中十分重要的一部分,促進傷口附近的血管重生,進而達到組織或是器官修復正是再生醫學所追求的目標。而一個理想的組織工程需要的細胞支架必須能讓細胞貼附生長並整合血管再生,加速受傷部位的恢復速度。在這項研究中,聚(癸二酸甘油酯)(PGS)是一種具有生物相容性,可以運用在血管組織工程修復上的材料。研究發現,PGS是具有生物相容性的彈性體,在體內、外都能夠進行降解,是可以運用在組織工程中理想的生物材料之一。在本研究中,PGS由癸二酸和甘油以等莫耳比聚合而成,並加入由羥基聚(3-羥基丁酸酯) (PHB)醇解酯化反應成的雙羥基聚(3-羥基丁酸酯)( PHB-diol)來合
成複合材料支架,PHB-diol以0.05、0.1以及0.15的莫耳比例取代部分原先欲與癸二酸聚合而成的甘油,進行聚合反應以後,可以得到不同比例的共聚彈性體,由於PHB-diol本身脆硬與其在降解時副產物能夠協助細胞培養的特性,我們期待加入PHB-diol之後不僅能助於細胞生長,同時改善PGS的機械性質。此外,本研究亦結合了先前實驗室以氯化鈉作為製孔劑在材料表面創造出微孔洞來讓支架提供更適合細胞生長的環境,藉以發展更適合細胞培養之生物材料。本研究中顯示,加入PHB-diol的比例越高,材料的交聯度越低,這是因為PHB-diol分子與甘油分子分子量差異巨大所導致。而加入PHB-diol可以提升P
GS材料本身的機械強度,由拉伸試驗的結果得知,加入PHB-diol的量越多,材料能夠承受的最大應力也隨之提升,能加強PGS機械強度不足的弱點。考慮到可能植入生物體內,材料的親疏水性也是必須考慮的,PHB的加入使複合材料更加的親水,但後續交聯程度降低時,也影響到親疏水性,使材料總體性質並不單純隨著PHB量增長而改變。以掃描式電子顯微鏡觀察材料表面的微結構,在加入作為製孔劑的氯化鈉顆粒前,材料表面平整,但加入氯化鈉顆粒並清洗去除乾淨後,可以看到均勻分布的微孔洞。透過細胞培養在材料上的結果顯示,PGS-PHB-diol複合材料並沒有明顯的細胞毒性,L929小鼠神經纖維母細胞跟內皮前驅細胞(EPCs)
的WST-1結果皆是如此。整體來說, PGS是一種可以讓細胞貼附生長的生物可降解材料,具有能提供細胞生長的環境條件,在血管組織工程上存在廣泛應用的潛能。
鳳梨果肉及其廢棄物之生理活性探討
為了解決除油膜soft99 的問題,作者黃薺緯 這樣論述:
現今大眾希望透過飲食來保持健康。研究發現植物含豐富植化素,有抗氧化及提高新陳代謝能力。鳳梨是台灣常見的經濟作物,全年皆可生產,其果肉可直接食用或做其他加工,如: 鳳梨酥、罐頭、蜜餞等。鳳梨富含營養成分,除了礦物質,還有維生素及膳食纖維,研究指出鳳梨中豐富的鳳梨酵素可用於治療骨關節炎、降低外科手術後的腫脹和發炎反應。鳳梨不被食用的果皮與莖部在處理上是一大工程,以往作為飼料或肥料,並無更有效利用,實屬可惜,因此尋找再利用的價值為主要研究方向。神經醯胺 (Ceramide)為細胞膜結構的主要成分,在皮膚角質層的屏障保護與保水能力扮演著重要角色。神經醯胺存在於許多天然植物中,如小麥、大米、玉米、馬鈴
薯、大豆和魔芋等。本研究使用土鳳梨、金鑽鳳梨與蜜寶鳳梨等常見鳳梨品種之果肉、果皮與莖部進行乙醇、甲醇與冷水萃取,評估萃取物是否具有抗氧化與抗發炎能力,並萃取出神經醯胺,投予以UVB照射之纖維母細胞,評估是否有修復光損傷能力。鳳梨莖部酵素有較高的活性,其中以蜜寶鳳梨莖部酵素活性最高,有247.27 (U/mg),其次為金鑽鳳梨莖部,酵素活性為161.45 (U/mg),最後為土鳳梨莖部,活性為102.13 (U/mg),三者具顯著性差異。抗氧化部分結果從EC50可知,在清除ABTS+自由基能力以鳳梨莖部水萃取物為最佳,EC50值分別為土鳳梨 (0.97 mg/mL)、蜜寶鳳梨 (1.14 mg/
mL) 及金鑽鳳梨 (1.32 mg/mL),而類黃酮測定中,顯示含量最高三者亦為鳳梨莖部冷水萃取物,分別為土鳳梨 (18.64 g/mg)、蜜寶鳳梨 (23.47g/mg) 及金鑽鳳梨 (17.26 g/mg)。還原力測定結果顯示,以金鑽鳳梨莖部甲醇萃取物最好,其EC50值為1.70 mg/mL。清除DPPH自由基測定中,三種鳳梨莖部甲醇萃取物之清除率較佳,與標準品BHA無顯著性差異,而總酚類化合物分析結果顯示蜜寶鳳梨莖部甲醇萃取物含量為25.68 (g/mg)、土鳳梨莖部甲醇萃取物為29.17 (g/mg)、金鑽鳳梨莖部甲醇萃取物為 30.40 (g/mg)。鳳梨萃取物有良好
的抗氧化能力,其莖部較果皮與果肉有較好的抗氧化能力。土鳳梨莖部水萃物之NO生成量顯著低於以LPS誘導發炎的負控制組,乙醇與甲醇萃取物之NO生成量在2000 g/mL下顯著低於負控制組,顯示土鳳梨以莖部降低NO生成效果較佳。金鑽鳳梨莖部水萃物在濃度1000 g/mL與2000 g/mL顯著低於負控制組,其乙醇與甲醇萃取物之NO生成量亦在2000 g/mL顯著低於負控制組。蜜寶鳳莖部乙醇與甲醇萃取物之NO生成量亦在1000 g/mL與2000 g/mL濃度下顯著低於負控制組。在細胞激素比值部分,三種鳳梨莖部水萃物比值顯著降低,金鑽鳳梨莖部之乙醇萃取物則在濃度500與1000 g/mL
下比值顯著低於負控制組。總體來說,鳳梨莖部萃取物可抑制促發炎細胞激素的生成,降低細胞激素比值,細胞傾向抗發炎反應,其冷水萃取物效果較乙醇與甲醇萃取方法佳,其中又以土鳳梨效果佳,於低濃度即可抑制NO生成及降低細胞激素比值。本研究萃取鳳梨神經醯胺方法為鳳梨凍乾粉末以乙醇萃取,接著再分離出石油醚層,收集其石油醚層後以分液收集器進行矽膠管柱層析分離,沖提液為石油醚與乙酸乙酯 (v/v=7:3),所得之萃取物置於-20℃環境下沉澱,並收集白色沉澱物。高效液相層析儀進行定量分析後結果顯示土鳳梨果皮萃取量顯著高於所有組別,萃取量為1.55 ppm。其餘組別間無顯著性差異。Hs68 纖維母細胞經照射UVB後細
胞存活率會隨著劑量提高而下降,照射劑量91.2 mJ/cm2細胞存活率為83.65%,當照射劑量達114 mJ/cm2時,細胞存活率低於80%,為74.51%。Hs68 纖維母細胞經照射 91.2 mJ/cm2 UVB 後加入鳳梨神經醯胺萃取物,在 0.625 g/mL 濃度下,細胞存活率有90.59%,且細胞存活率隨著萃取物濃度提高而增加,在濃度 10 g/mL 下,細胞存活率有97.57%,顯著高於負控制組 (83.65%) 與低劑量0.625 g/mL 組別。由此得知萃取物可對被UVB照射而受傷的纖維母細胞有促進增生的現象。整體來說,鳳梨莖部有較高的酵素活性。鳳梨萃取物有良好的抗
氧化能力,尤其以莖部比果皮與果肉有較好的效果。鳳梨莖部萃取物可抑制促發炎細胞激素的生成,並降低細胞激素比值,其冷水萃取物效果較乙醇與甲醇萃取方法佳,其中又以土鳳梨水萃物效果較佳,於低濃度下即可抑制NO生成及降低細胞激素比值。鳳梨凍乾粉末以乙醇及石油醚萃取並以矽膠管柱層析分離出鳳梨神經醯胺。土鳳梨果皮萃取量顯著高於其餘萃取物,且可促進被UVB照射而受傷的纖維母細胞增生。
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